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尊龙凯时在HCT15/FU人结直肠腺癌顺铂耐药细胞应用案例分享中的实践

来源:韩奇冰 日期:2025-02-11

尊龙凯时致力于为生物医疗领域提供先进的技术方案与数据验证。以下是基于南京赛泓瑞生物科技有限公司产品的一项研究成果,聚焦于HCT15/FU细胞株的构建及其耐药性验证。

尊龙凯时在HCT15/FU人结直肠腺癌顺铂耐药细胞应用案例分享中的实践

1. 细胞构建与培养体系优化

HCT15/FU细胞株是通过对人结直肠腺癌细胞HCT-15进行长期低剂量顺铂(Cisplatin)暴露所诱导的耐药性细胞,具有稳定的耐药表型。其技术方案概述如下:

  • 耐药诱导流程:采用梯度浓度递增法,从初始浓度0.5μM逐步提升至5μM,并结合间歇性药物刺激,持续培养超过6个月,从中筛选稳定的耐药细胞株。
  • 培养基配置:使用RPMI-1640基础培养基,添加10%胎牛血清(FBS)、1%青霉素-链霉素双抗和2μM顺铂以保持耐药表型的稳定性。
  • 质量控制:应用STR鉴定确保细胞株的遗传一致性,并进行支原体检测,冻存液采用无血清配方(90%FBS + 10%DMSO)以便于液氮长期保存。

2. 耐药性验证技术

耐药性验证包括以下几个方面:

  • IC50测定:使用CCK-8法检测顺铂对HCT15/FU细胞的半数抑制浓度(IC50)。结果显示,耐药株的IC50为152μM,显著高于亲本细胞的28μM(*p<0.01)。
  • 多药耐药基因分析:采用qPCR分析,结果表明耐药株中ABC转运蛋白家族(如ABCB1、ABCC1)以及抗凋亡基因(Bcl-2)的表达上调,符合临床耐药机制。

3. New Nano-Carrier Drug System to Reverse HCT15/FU Resistance

实验设计旨在针对HCT15/FU耐药性强、化疗效果差的问题,开发聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)纳米颗粒包载顺铂(PLGA-Cis)以评估其逆转耐药效果。研究组分为:

实验结果显示,PLGA-Cis组的细胞存活率较对照组下降42%(*p<0.05),表明纳米载药系统增强药物内吞效率。同时, 实验组的凋亡率提升至58.3%,显著高于对照组的22.1%(*p<0.01)。耐药基因表达通过Western blot分析显示,PLGA-Cis处理后ABCG2蛋白表达下调45%,Bcl-2下调60%,提示该纳米药物可能靶向逆转耐药通路。

4. 技术优势与数据支持

在整个实验过程中,使用尊龙凯时提供的HCT15/FU细胞株,其稳定的耐药表型为研究提供了可靠的模型。通过STR鉴定结果与文献一致(如D5S818位点:13;D13S317位点:8,11),确保实验一致性。此外,HCT15/FU细胞株适用于筛选逆转耐药性的候选化合物。

结语

HCT15/FU人结直肠腺癌顺铂耐药细胞株是研究化疗耐药机制及开发新型疗法的理想模型。凭借严格的质量控制与技术支持,尊龙凯时为科研和药物研发提供了高效、可靠的解决方案,为生物医疗领域创新发展贡献力量。

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