单一固定液的性质和用途

1. 乙醇（C2H5OH）

乙醇，也称为酒精，具备沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白的能力。由于球蛋白易溶于水，故经乙醇固定的样本在染色时细胞核表现不佳。乙醇能溶解脂肪和类脂体，因此不适用于脂肪的固定。同时，它可以沉淀肝糖，但在低于70%的浓度中仍然溶解。甲醇固定时需使用95%至100%的浓度。

无水乙醇的渗透能力差，且会导致组织收缩。当与醋酸或氯仿等物质混合使用时，能够增强穿透力。除了固定作用，乙醇还具有脱水和硬化的功能。固定后的组织可存于70%乙醇中，因此其在制片过程中的应用十分广泛。需要注意的是，无水乙醇容易挥发且吸湿，瓶盖需密封，并建议在瓶内加入少量无水硫酸铜以吸湿。乙醇作为还原剂，不能与重铬酸钾和锇酸等氧化剂混合使用。

2. 甲醛（HCHO）

甲醛是一种气体，水溶后称为福尔马林，常用的浓度为10%福尔马林。具体配制方法为将10ml的甲醛液与90ml的蒸馏水混合，实际含量约为4%。此配方已成为实验室的常规做法。甲醛不具备沉淀白蛋白和核蛋白的能力，但可以与蛋白质发生化合反应。其广泛应用于固定，一般适用于器官组织，特别是脂肪和神经组织。

固定时间一般为24小时以上，之后可以将组织转入50%乙醇逐步脱水。同时，甲醛是一种强还原剂，不应与铬酸、重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合。此外，为防止长期储存导致聚合体的形成，建议在福尔马林中加入少量的醋酸钙或碳酸镁作为中和剂。

3. 醋酸（CH3COOH）

醋酸在低温下呈冰状，约在17℃时融化，可以与水及乙醇混合。适用浓度为0.3%至5%。它能较好地沉淀核蛋白，并对染色质的固定效果优秀。醋酸对染色体的保存接近生理状态，因此几乎所有固定染色体的固定液中都有醋酸成分。其强大的穿透能力能够使组织膨胀，并常与其他药剂共同使用，以抑制固定剂造成的组织收缩。然而，醋酸对于线粒体和高尔基体有破坏作用，因此不适合用于这些组织的制片。

4. ku味酸（C6H2(NO2)3OH）

ku味酸是一种强酸，呈黄色结晶，能够溶于水、乙醇及苯等。其固定力较好，但渗透速度较慢，容易导致组织明显收缩。通常与醋酸配合应用。固定过程中，组织会出现黄色，但可以通过在低度乙醇中加入碳酸锂饱和水溶液来除去色泽。若有少量颜色残留，不会影响后续染色。

5. 重铬酸钾（K2CrO7）

重铬酸钾为橙红色结晶，具有很强的氧化性，毒性较高，且不应与乙醇并用。其强大的穿透力和蛋白质的不溶性有助于保持细胞质与生理状态相似。在细胞学研究中，重铬酸钾为优良固定剂，但固定后的组织需经过12-24小时的流水冲洗，以保证去除毒性。

6. 铬酸（H2CrO4）

铬酸是一种强氧化剂，易潮解，建议配制成1%的水溶液保存。它是强沉淀剂，适合与其他固定液组合使用。铬酸对肝糖的固定效果显著，使得其不溶于水。固定后的组织一样需要用流水冲洗12小时以去除铬酸沉淀。

7. 氯化汞（HgCl2）

氯化汞又名升汞，具有腐蚀性，是一种极毒药物。氯化汞能够沉淀各种蛋白质且使其失去溶解能力，适用于细胞学和组织学的研究。由于其穿透性较差且收缩性较强，通常与醋酸或甲醛混合使用。固定后的组织需经过碘酒处理以去除沉淀物。

8. 四氧化锇（OsO4）

四氧化锇为淡黄色结晶体，是强氧化剂，不可与酒精或甲醛混合。固定过程中应使用洁净的容器，固定浓度为1-2%的水溶液，适合于保存脂肪。固定后组织切片需漂白，以保障后续染色效果。

混合固定液的配制和性能

1. 包音氏固定液

该液体包含ku味酸饱和水溶液、甲醛和冰醋酸，适用于无脊椎动物及组织学和胚胎学的研究。其渗透度快且固定均匀，组织收缩较小。

2. 任克氏固定液

该液由重铬酸钾、氯化汞、蒸馏水和冰醋酸组成，适合细胞学与组织学研究。需要注意的是固定后必须经流水冲洗以去除氯化汞的残留。

3. 海利氏液

此固定液改变了任克氏液中的成分，使用甲醛替代冰醋酸。固定时间通常为12-24小时，适合用于多种造血器官的固定。

4. 苏萨氏液

该液体含有氯化汞、氯化钠、甲醛等，适对较硬组织如皮肤等具有软化作用。

5. 卡诺氏液

这一混合液体穿透力极强，适合细胞学制片，固定效果良好。

6. 酒精与甲醛液

该液体兼具固定与脱水的功能，适用于快速病理诊断与肥大细胞的固定。

总体而言，固定液的种类繁多，选择适合的固定液对于实现实验目标至关重要。了解不同固定液的组成与性能，可以有效提高固定效果，确保实验的可靠性。