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NEWS尊龙凯时:高效进行细胞siRNA和miRNA转染的方法
来源:于琰绍 日期:2025-03-14在基因功能研究中,siRNA和miRNA作为重要的工具具有广泛的应用。siRNA,即小干扰RNA,通常为人工合成的双链RNA分子,长度通常为19至23个核苷酸。这些分子能够特异性结合并降解细胞内的目标mRNA,从而实现基因沉默,抑制特定基因的表达。相比之下,miRNA(微小RNA)则为由机体自源生成的非编码单链RNA,长度约为22个核苷酸,它通过与mRNA的3'非翻译区(3'UTR)互补结合来调控基因表达。
尽管siRNA和miRNA的转染技术在基因功能的研究、疾病机制的揭示及药物靶点的发现中具有重要意义,但在实际操作中,细胞毒性和转染体系的问题常常导致转染效率不如预期。因此,如何提升转染效率成为了研究人员关注的重点。
1. **保证高纯度的siRNA或miRNA**:确保使用经过PAGE纯化和脱盐处理的高纯度siRNA或miRNA能显著提高转染效率。
2. **确保细胞状态良好**:细胞密度应达到70%-80%才适合进行转染,保持细胞的生长活力,以降低细胞毒性并优化转染结果。
3. **避免RNA降解**:在整个实验过程中使用无RNA酶和无热原性的材料,例如离心管、枪头和缓冲液,以防止RNA在实验中降解。
4. **进行转染试剂与RNA比例的预实验**:不同细胞系对转染试剂的耐受度不同,因此需进行梯度实验,以确定最佳RNA浓度,从而提高实际实验中的转染效率。
5. **使用无血清或低血清培养环境**:建议在无血清或低血清的培养基中进行转染,以避免转染试剂与RNA结合时受到干扰,从而提高转染效果。
6. **选择合适的转染试剂**:不同细胞对转染试剂的敏感度不同,需根据文献或个人经验选择最适合的转染试剂。
尊龙凯时推出的CelthysiRNA/miRNA体外转染试剂专为siRNA和miRNA的转染设计,能够在多种细胞系中实现超高的转染效率,助力科研人员在siRNA/miRNA相关基因研究中取得突破。该产品不仅提升了转染效率,更从根本上解决了转染效率低的问题。
此外,尊龙凯时的转染试剂在保障超高转染效率的同时,维持极低的细胞毒性,确保细胞的正常生理功能。这一广泛适用的产品经过多种细胞类型的验证,包括Hela、MCF-7和HepG2等,能够轻松应对难以转染的悬浮细胞系,如K562和THP-1细胞,达到80%以上的沉默效率。
总之,结合尊龙凯时的创新转染试剂与提升转染效率的策略,科研工作者能够更有效地推进基因功能研究和相关疾病机制的探索。
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