猪流感通用荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法）使用说明书

产品信息

产品名称：猪流感通用荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法）

英文名称：Swine Influenza Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)

包装规格：50T/盒

预期用途

本试剂盒采用实时荧光PCR原理，以定性检测猪流感病毒为目的，具有重要的指导意义，在猪流感及其并发症的诊断与疗效评估中发挥关键作用。

原理

本试剂盒通过针对猪流感病毒的高度保守区域设计特异性引物和探针，确保在反应体系中出现猪流感病毒基因组模板时，PCR反应可顺利进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪可对PCR过程中相应通道信号进行实时监测，从而实现检测结果的定性分析。

试剂盒组成

• 1. SIV RT-PCR反应液 875 μL × 1管
• 2. SIV混合酶液 125 μL × 1管
• 3. SIV阳性对照 40μL × 1管
• 4. SIV阴性对照 40μL × 1管
• 5. 说明书 1份

注：阴性对照为灭菌纯水，阳性对照为含猪流感病毒靶基因的质粒。

储存条件及有效期

试剂盒应避光保存于-20℃以下，避免反复冻融，有效期为12个月。

适用仪器

兼容多种多通道实时荧光定量PCR仪，包括ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列及杭州博日系列等。

样本要求

1. 取样方法：

• (1) 咽喉拭子：取拭子深入喉头及上颚裂，来回刮3至5次取咽喉分泌液。
• (2) 鼻拭子：将拭子深入鼻腔及周围沾取分泌液。
• (3) 将咽喉拭子和鼻拭子放入含10mL生理盐水的离心管中备用。

2. 血液或血清样品：使用无菌注射器抽取样品，并置于离心管中待检。

标本采集后应立即检测，若无法立即检测，可在2℃至8℃条件下冷藏过夜，长期保存需置于-80℃以下以避免反复冻融。

检验方法

1. 试剂准备：从冰箱中取出试剂盒，充分融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着液体。

2. 样本准备：使用QIAGEN或Roche公司的RNA提取试剂盒提取RNA，具体按照说明书操作。

3. 加样：在PCR反应管中加入处理好的待测标本RNA各5μl，终体积25μl/管，混匀后瞬时低速离心。

4. PCR扩增：将反应管置于实时荧光定量PCR仪样品槽，按要求设置扩增参数进行PCR扩增。

检测结果的解释

1. 阳性对照：有典型S型扩增曲线或Ct值≤35。

2. 阴性对照：Ct值＞38或无Ct值，线形为直线或轻微斜线，无指数增长期。

3. 标本结果：阳性：Ct值≤35或有明显指数增长期；可疑：Ct值在35～38范围内，需重复检测；阴性：Ct值＞38或无Ct值。

注意事项

1. 实验室应遵循国家基因扩增检验实验室管理规范进行管理。

2. 样本处理应在0-4℃条件下进行，并及时上机检测。

3. 各区域物品应专用，避免交叉使用以防污染。

4. 使用后的吸头应直接丢弃，工作台及实验用品应定期消毒。

尊龙凯时为您的检测提供高效可靠的产品，助力生物医疗领域的科学发展。

产品的最低检出限为103 Copies/mL，产品CV值≤3%。确保在有效期内使用，并请遵循操作规范，以获得最佳的检测结果。