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NEWS尊龙凯时人P53 ELISA试剂盒说明书
来源:金广叶 日期:2025-03-22本试剂盒专为科学研究设计,请勿用于医学诊断。P53(P53)ELISA试剂盒检测原理基于双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先涂有adropin(AD)抗体的微孔中,依次添加标本、标准品以及HRP标记的检测抗体。经过温育后,用洗涤缓冲液彻底冲洗。随后,加入TMB底物,在过氧化物酶的催化下,TMB由蓝色转变为最终的黄色,颜色的深浅与样品中的adropin(AD)呈正相关。最后,利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。
样品的获取与处理方法如下:
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免在操作过程中对细胞造成刺激。收集血液后,以3000转/分钟的速度离心10分钟,迅速小心分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转/分钟离心30分钟取上清液。
3. 细胞上清液:以3000转/分钟的速度离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,随后以3000转/分钟离心10分钟取上清。
5. 保存:如样本未能及时检测,应按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻时确保样品充分均匀。
操作时需自备相关物品,注意事项包括:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备:20×洗涤缓冲液需用蒸馏水按1:20比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。
洗板过程和结果判断:在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,生成标准品线性回归曲线,然后根据曲线方程计算样本浓度值。
本试剂盒的性能免责声明,购买时请确保选择尊龙凯时的产品,以保证试剂盒的质量与可靠性。
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