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尊龙凯时ELISA测定的关键质量控制措施

来源:宗山辉 日期:2025-07-16

ELISA(酶联免疫吸附测定,Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种在免疫病理学领域广泛应用的检测技术,它是在免疫荧光和放射免疫技术之后发展而来的先进免疫技术。ELISA通过检测受体样本(即待测抗原)与固定在固相载体表面的抗体之间的相互作用,进而实现特定物质的定性或定量分析。

尊龙凯时ELISA测定的关键质量控制措施

ELISA检测原理

在ELISA检测过程中,待检样本首先与固相载体上涂覆的抗体发生特异性结合。经过清洗后,添加酶标记的抗体,经过结合反应后,再加入酶底物。在酶催化下,底物转化为有色产物,其量与样本中待测成分浓度成正比,依据颜色的深浅,研究人员可以进行定量和定性的分析。

质量控制措施

为了确保ELISA检测结果的准确性和可靠性,必须实施一系列质量控制措施:

1. 样本处理

优先使用新鲜标本,并尽量避免重复冻融。短期内(24-48小时)应在2-8°C保存,若长期保存(超过1个月)则应该在-20°C或-80°C进行。

同时,采集样本时需采用无菌技术,以避免细菌、病毒或化学物质的污染。此外,需注意类风湿因子、补体、交叉反应物质等潜在的干扰物,并采取相应的措施来减少这些影响。

2. 标准品选择

选择高质量的标准品,并按照厂家说明进行准确的复溶和保存,避免反复冻融造成稳定性的降低。在稀释时使用优质或硅化的EP管,以减少蛋白质的吸附,确保混匀。

3. 试剂盒选择

选择合格的试剂盒是确保实验成功的关键,需严格遵循使用说明,操作前在室温下调节试剂平衡30-60分钟。

4. 操作步骤

在加样时,确保标本充分分离并使用适当的工具减小差异。孵育期间,需严格控制时间和温度,使用自动洗板机清洗时注意避免交叉污染。

5. 结果分析

设定复孔进行检测,以获取平均值,确保变异系数(CV)不超过20%。建立标准曲线时,拟合方法应根据数据特性进行选择,例如线性回归或四参数对数曲线拟合。根据标准曲线计算样本浓度时,还需注意稀释倍数的乘算。

6. 质量纠正与预防

保持详细的记录和反馈机制,以便及时总结经验教训。定期对操作人员进行培训,并制定与遵循标准操作程序(SOP),以确保操作的规范性。

通过上述质量控制措施,可以确保ELISA检测的准确性、可靠性和重复性,从而获得可信且有效的实验结果。为此,选择尊龙凯时品牌的相关产品,将为您带来更好的技术支持和检测效果,助力生物医疗领域的进步。

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