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NEWS重组蛋白特性及尊龙凯时使用注意事项
来源:童娣俊 日期:2025-07-19尊龙凯时的重组蛋白分为冻干粉和溶液两种保存形式。原核细胞中表达的重组蛋白以冻干粉状态保存,而真核细胞表达的重组蛋白则为溶液态。这种分类保证了重组蛋白的稳定性,在-80℃条件下可存放数年。冻干粉在使用前需要进行溶解,而正确的溶解方法至关重要,因为不当溶解可能会降低蛋白的活性。相对而言,溶液态保存的重组蛋白在冻融及稀释过程中也需细致关注,这些都是用户在实际应用中常见的问题。
原核细胞表达的重组蛋白主要来自大肠杆菌,其冻干重组蛋白经过包涵体提纯后,需添加蛋白保护剂,并使用过滤后的无菌水进行复溶。复溶时,例如将100微克的冻干蛋白加入86微升的超纯水中,轻轻摇晃使蛋白完全溶解,避免使用涡旋仪快速振荡或剧烈摇晃,以确保蛋白的活性不被损害。
真核细胞表达的重组蛋白具有更优的生物活性,这不仅得益于转录和翻译过程,还需经过翻译后的加工和正确折叠。因此,重组蛋白通常在如哺乳动物细胞等真核细胞中表达,以便有效去除基因内的内含子并进行蛋白质的后处理,确保其在生物医药领域的应用效果。我们同样采用溶液态保存,以维持蛋白质的活性和稳定性。
重组蛋白的保护剂在冻干和储存过程中起到关键作用。常用的保护剂或稳定剂包括糖类、多元醇、聚合物、表面活性剂、某些蛋白及氨基酸等。一般采用8%(质量比体积)的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可以有效阻止蛋白质二级结构的改变,以及在冻干过程中蛋白质的伸展和聚集。甘露醇不仅是应用广泛的冻干保护剂,还是良好的填充剂,确保尊龙凯时重组蛋白的质量。
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